不同细胞研究中添加的重组蛋白有所不同。人胚胎干(ES)细胞研究中的重组蛋白主要有,细胞培养用人重组actin A,bFGF,IGF-II等,细胞分化用BMP-4,EGF和HGF。间充质干(MSC)细胞研究中的重组蛋白主要有,间充质干(MSC)细胞培养和自我更新的生长因子:LIF,bFGF,EGF,HGF,PDGF和Wnt3,MSC分化的生长因子或细胞因子:BMP-2与TGF-β1。神经干细胞(NSC)研究中的重组蛋白主要有,重组EGF,重组bFGF,和重组VEGF,用于神经干细胞的扩增。此外,包括BDNF在内的多几种神经营养因子例如BDNF,CNTF,和GDNF也可适用于相关研究。重组蛋白的表达与纯化方法。PeproTechIL-4重组蛋白
由于重组蛋白通常在不同的表达系统中生产,容易受到各种因素的影响进而引起蛋白质的性质出现差异,因此为了保证获得高质量,稳定的结果,在药物分析、新药研发、细胞 therapy等应用中优先选择GMP(Good Manufacturing Practice, 良好生产规范)级重组蛋白。GMP要求企业从原料、人员、设施设备、生产过程、包装运输和质量控制等方面达到法规相关要求,形成一套可操作的作业规范。GMP级重组蛋白具有以下几个优点:详实的产品信息;严格的质量管理体系;批次间稳定性高;无外源动物源性。PeproTechIL-4重组蛋白提供国内外知名品牌的重组蛋白,种类齐全,价格优惠。
重组蛋白具有极高的经济价值和科研价值,但是在哺乳动物细胞中使用稳定转染方法将会消耗大量的时间,而传统的瞬时转染方法,在产量上也难以令人满意。所以重组蛋白大规模的瞬时表达技术是近年来的一个研究热点,已有报道能放大到 100L反应器中生产重组蛋白,产量(分泌型蛋白)可达 1-10mg/L。不过该方法技术条件要求高,如质粒的纯度、转染的效率等。哺乳动物细胞表达系统中,重组蛋白的表达水平与许多 因素相关,如转录和翻译调控元件、RNA剪接过程、mRNA稳 定性、基因在染色体上的整合位点、重组蛋白对细胞的毒性作 用以及宿主细胞的遗传特性等。
近年来,用于重组蛋白表达和纯化的技术和产品迅速增长。自从亲和标签融合技术出现以来,多种多样的短肽或蛋白亲和标签极大地方便了外源表达重组蛋白的分离与蛋白质复合体的纯化,已成为蛋白质研究领域不可或缺的工具。多聚组氨酸标签(His-tag)是目前高通量蛋白纯化普遍使用的亲和标签,His 标签融合蛋白的固定化金属离子亲和层析(immobilized metal-ion affinity chromatography, IMAC)被作为主要的蛋白纯化方法。从重组蛋白的表达优化,到小量诱导纯化,再到中试、大规模生产需要众多繁琐、大量的工作。快速、可靠、高效的自动化分离分析技术可极大地提高效率,降低时间、人员成本。PeproTech提供多种高质量细胞因子和重组蛋白,包装规格多,备受科学家青睐。
功能性ELISA是一类以ELISA形式进行的、基于体外配体结合的分析法。该方法用于检测目的蛋白与其天然结合物配体之间(如生长因子与其受体)的结合能力。如果在该检测中生长因子能够与其天然受体相结合,则该生长因子很可能是具有功能的。ED50为OD值读取过程中能够提供50%信号强度的生长因子浓度(在包被了受体的平板上)。重组蛋白使用了基于细胞的检测分析或功能性ELISA分析对其生物学活性进行了检测,产品页上会提供相应的ED50值。也有些重组蛋白没有提供生物活性数据。在大多数情况下,这表明没有进行生物活性测试,但它并不一定意味着蛋白是没有活性的。在没有生物活性数据的情况下,这些蛋白可用做蛋白质分子量标准,蛋白免疫印记阳性对照(如果是全长的重组蛋白)或免疫原。其它可能的用途是配体结合试验或ELISA的标准品。重组蛋白疫苗有着天然的优势。PeproTechIL-4重组蛋白
进口重组蛋白质量好,能保证实验结果。PeproTechIL-4重组蛋白
市场上重组蛋白通常以冻干形式售卖,这是因为蛋白质对热敏感,冻干能使蛋白质在存储过程中保持活性,延长保存时间,同时也能降低运输成本。但是冻干对蛋白质的活性会有一定的影响,可能造成蛋白质部分失活、聚集和其它变性等。这个时候,就需要通过加入保护剂(稳定剂,添加剂,辅料)和控制冻干的各种条件来尽可能降低这些负面的影响,尽可能的保护蛋白的活性。常见的保护剂或稳定剂包括糖类,多元醇,聚合物,表面活性剂,某些蛋白和氨基酸等。PeproTechIL-4重组蛋白
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